在第三届全球精准医疗（中国）峰会“细胞治疗临床研究与产业化”分会场上（会议日程见下图），细胞治疗临床和产业界嘉宾齐聚一堂，深入探讨细胞治疗的临床进展和产业化面临的挑战和解决方案。
随着越来越多的基因和免疫疗法获批进入临床试验，在细胞培养过程中，包括293细胞和免疫细胞培养，对不含有动物源（包括人血来源）和不含有不确定性组分的培养基的需求也愈加迫切。更重要的是，培养基中的动物源组分和天然细胞因子及生长因子等对免疫细胞的影响也受到行业的重视。因此会议主办方特别邀请了全球无血清细胞培养基代表公司之一FUJIFILM Irvine Scientific来分享细胞治疗cGMP级别培养基的开发进展。
FUJIFILM Irvine Scientific公司生物制药和细胞治疗业务中国区区域经理冯见先生做了主题为《新一代无血清、化学成分限定细胞治疗培养基的开发和应用》的报告，分享FUJIFILM Irvine Scientific公司在新一代细胞治疗培养基开发领域的思考和进展。
FUJIFILM Irvine Scientifc公司中国区区域经理冯见先生首先向与会听众介绍了公司的发展历史和业务范围:
FUJIFILM Irvine Scientifc是全球影像和医疗器械巨头富士胶片(FUJIFILM)集团成员，作为全球领先的专注于细胞培养产品创新研发和生产的高科技公司，FUJIFILM Irvine Scientifc具有超过48年的历史，在工业细胞培养、辅助生殖、细胞治疗和细胞遗传学等领域享有盛誉，公司遵从国际ISO和FDA的严格监管，并在美国加州和日本东京同时拥有国际一流的cGMP干粉培养基生产设施。
FUJIFILM Irvine Scientifc公司基于多年细胞培养基开发经验和对细胞生物学的深入理解，研发团队最新开发了一系列的cGMP细胞治疗培养基以支持细胞治疗产业的临床和商业化应用，包括
– 全球首个无血清、无动物源、化学成分限定的T细胞培养基
– 全球首个无血清、无动物源、化学成分限定的NK细胞培养基
– 新一代无血清、无动物源、化学成分限定的DC培养基
– 新一代无血清、无异源组分的扩增培养基和造血干/祖细胞培养基
– 用于高效经济病毒载体制备的新一代无血清、化学成分限定的悬浮293细胞培养基
– 无蛋白、无动物源、化学成分限定的免疫细胞细胞冻存液
– 无动物源、无DMSO、化学成分限定的间充质细胞冻存液
FUJIFILM Irvine Scientifc公司的大多数细胞治疗培养基均已向FDA提交了DMF(Drug Master File)，同时在积极配合全球不同地区监管部门的要求进行申报或备案，从而消除细胞治疗企业在监管方面的顾虑。
FUJIFILM Irvine Scientifc公司长期以来遵守严格的cGMP/医疗器械质量管理体系，从而最大程度上保证产品的安全性和稳定性。冯见先生介绍了FUJIFILM Irvine Scientifc公司在细胞治疗培养基领域对”Chemically Defined”和“Animal Component Free”的定义：
“Chemically Defined”指培养基中的组分和浓度是明确的，而且不能包含有人血浆来源的白蛋白，因为在申请临床试验过程中，监管部门对人血来源的白蛋白和重组的白蛋白要求提供的文件是不同的，而且越来越多的数据表明，不同批次人血来源的白蛋白对T细胞生长和表型有显著的影响。
“Animal Component Free”意味不能有人或者动物来源的成分，并且只能使用植物或细菌产生的重组蛋白而不能使用来自动物或昆虫细胞表达的蛋白。
冯见先生介绍了公司研发团队在开发针对不同T细胞亚群的培养基方面所做的工作。在这项工作中，团队花了大量时间与精力研究各种营养成分在无血清、限定条件下的影响。尤其地，研发团队研究了细胞培养基中单独和组合的成分对T细胞生长和分化的影响。
例如，冯见先生分享了关于脂质A（LA）如何特异性地促进CD8+ T细胞扩增的数据（下图）。
图：T细胞培养基中的脂质对细胞的影响
另一个是关于金属离子对细胞影响的例子。数据表明，虽然金属离子A有利于扩增CD4+和CD8+ T细胞，但与单独的金属A离子相比，添加B效果更明显（下图）。
图：T细胞培养基中的金属离子对细胞的影响
通过详细研究这些成分并利用这些结果，他们了解到，在无血清、成分明确的条件下，不同的培养基成分对T细胞亚群的影响完全。此外，通过合理有效的培养基设计和开发，可以实现有针对性的T细胞亚群的最优化扩展。
化学定义和无动物源成分的主要优点
冯见先生继续讨论了使用化学成分明确的无动物源成分配方进行T细胞培养的主要益处。首先就是结果的一致性。使用动物源成分时，可以明显观察到影响细胞表现的批与批差异。通过去除这些成分，可以提高一致性并获得可靠且可重复的结果。并可以获得更好的原料控制过程，这意味着细胞治疗企业不必对多批动物源原料进行预先检测和鉴定，以找到具有最优化性能特征的原料。此外, 通过消除动物源成分，提高安全性，从而实现更顺畅的监管批准途径。
FUJIFILM Irvine Scientifc公司最新上市的细胞治疗培养基中，是没有添加人血来源的白蛋白，使用过程中不需要添加人AB血清或者自体血浆或其他人血来源的血清替代物，可以提高细胞表现的稳定性，并减少监管申报方面的工作，这也将是未来细胞治疗领域的趋势。
PRIME-XV T细胞培养基性能
FUJIFILM Irvine Scientifc公司的PRIME-XV T细胞培养基的一些特定益处， 数据显示其优于其他商业化的Xeno-free T细胞培养基（ 下图）。
图. 来自人外周血单核细胞的CD3+ T细胞在补充有IL-2的PRIME-XV T细胞CDM培养基或市售的无异种成分的培养基中培养。 9天后，检测CD3+ T细胞的活力和扩增倍数。
冯见先生还介绍了公司在18年8月上市的全球第一个无血清、无动物源、化学成分限定的NK细胞培养基PRIME-XV NK CDM ，用于NK细胞(包括NK92等)在无血清、化学成分明确条件下的培养和扩增，根据公开的测试数据，无论在添加或不添加滋养层细胞的情况下，PRIME-XV NK CDM 细胞培养基都能表现出良好的结果。
细胞冻存是细胞治疗应用中另外一个关键的环节， 冻存试剂和方案直接影响着最终细胞的状态和活力。冯见先生重点介绍了FUJIFILM Irvine Scientific公司的两款cGMP级别的、均已向FDA提交了DMF的无血清、无动物源、化学成分明确的细胞冻存液。一款是用于免疫细胞(或其他生物制药行业常用细胞包括CHO细胞等)冻存的无血清、无蛋白冻存液，根据公开的数据，在细胞冻存复苏后，细胞能维持良好的状态和活力。
另一款是无DMSO、无动物源的无血清冻存液，主要用于间充质的冻存， 根据公开的数据，在间充质复苏并经过多次传代后，间充质依然能维持特异性Marker的正常表达并呈现良好的细胞形态。
最后冯见先生重新强调了在细胞疗法的放大和商业化生产中使用无动物源的、化学成分确定的培养基的好处。消除动物和其他不确定的成分可以最大限度地降低引入外来因子的风险并大大简化下游处理的复杂度。FUJIFILM Irvine Scientific公司为培养基设计了监管标准，以实现从研究到临床制造的无缝过渡。这包括确保培养基的制造符合cGMP规定，完整的可追溯性文档和广泛全面的原材料供应链控制计划，以确保最高质量的产品。
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