甲磺酸伊马替尼（Imatinib mesylate）由诺华（Novartis）研发，2001年2月，诺华公司向美国食品药品管理局（FDA）递交了上市申请；2001年5月，美国FDA仅用2个半月的时间就加速批准了该申请。之后，于2001年11月在欧盟获得批准上市，2002年4月在中国获得批准上市，2005年3月在日本获得批准上市。格列卫为甲磺酸伊马替尼在中国的商品名，在美国为“Gleevec”，在欧洲为“Glivec”。
适应症：2001年5月，美国FDA仅用2个半月的时间就加速批准了伊马替尼用于治疗晚期费城染色体阳性的慢性粒细胞性白血病(CML)；2002年2月，FDA通过加速批准途径批准伊马替尼治疗晚期或转移胃肠道间质细胞肿瘤(GIST)，同期也很快被欧盟专利药品评审委员会(CPMP)批准；2003年3月，FDA批准甲磺酸伊马替尼用于CML的一线治疗；2003年5月，FDA批准甲磺酸伊马替尼治疗Ph染色体阳性的儿童CML患者；2006年，美国FDA批准甲磺酸伊马替尼用于治疗Ph染色体阳性的急性淋巴细胞白血病(ALL)患者，且甲磺酸伊马替尼联合化疗遂成为Ph染色体阳性ALL的一线治疗方案；2008年，FDA又通过加速批准途径批准其用于有可能根治性切除但复发危险增加的GIST肿瘤病人；2011年，获得美国和欧盟批准其治疗急性淋巴细胞白血病儿科患者。
专利：化合物专利已于2013年过期，晶型专利到期日为2018年7月16日，制剂专利在国内已被驳回。 建议本项目开发选择与原研一致的晶型进行开发，降低体内BE风险。
2.1 参比制剂的选择
根据CFDA颁布的仿制药参比制剂目录（第八批），可根据仿制药剂型选择原研进口的甲磺酸伊马替尼胶囊（规格0.1g，注册证号H20150294）或甲磺酸伊马替尼片（规格0.1g、0.4g，注册证号H20150112、H20150298）作为参比制剂。
2.2 药物信息
API 甲磺酸伊马替尼
化学名：4-[(4-甲基-1-哌嗪)甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶)-2-嘧啶]氨基]苯基]-苯胺甲磺酸盐
分子式：C29H31N7O・CH4O3S
分子量：589.71
CAS编号：220127-57-1
理化性质
外观/性能：白色至浅黄色或浅棕色结晶性粉末
熔点：210 ～ 220℃
酸碱解离常数：pKa1 ＝ 7.8、 pKa2 ＝ 3.8、 pKa3 ＝ 3.3 （溶剂：1,4-二恶烷/水混合物）
溶解性：易溶于水，易溶或微溶于二甲亚砜、甲醇和乙醇（95），难溶于其他非极性溶剂（如正辛醇，丙酮和乙腈）。溶解性存在pH依赖性，在pH小于等于5.5的缓冲液中易溶，在中性/碱性环境中极微溶解甚至几乎不溶
在各种溶剂中的溶解度(w/v％，23 ～ 25℃)
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溶剂名称 |
溶解度 |
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水 |
130 |
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甲醇 |
1.9 |
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乙醇（95） |
0.4 |
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乙腈 |
0.005 |
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1-辛醇 |
<0.001 |
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磷酸盐缓冲液pH 5.5 |
≧10 |
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磷酸盐缓冲液pH 6.0 |
0.1 |
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磷酸盐缓冲液pH 8.0 |
<0.001 |
吸湿性：在25℃，75％RH条件下储存7天未观察到吸湿性。
分配系数：D ＜ 0.01（1-辛醇/0.1mol/L盐酸），D ＞ 100（1-辛醇/pH6.8磷酸盐缓冲液。
稳定性：在长期稳定性条件下（温度25℃､湿度60%）36月、加速稳定性条件（温度40℃､湿度75%）6月条件下样品均保持稳定。
生物学特性
本品口服给药后吸收良好，在2-4小时后出现最大血药浓度（Cmax）。平均绝对生物利用度为98%，口服后血浆中伊马替尼AUC的变异系数波动在40～60%之间。与空腹时比较，高脂饮食后本药吸收率有轻微降低（Cmax减少11%，tmax延后1.5小时），AUC略有减小（7.4%）。
伊马替尼及其主要活性代谢物N-去甲基化哌嗪衍生物的血浆消除半衰期分别为约18小时和40小时，该代谢物的血浆AUC是原药甲磺酸伊马替尼AUC的16%。伊马替尼约81％的剂量在7天内消除，其中从粪便中排泄68%，从尿液中排泄13%，主要以代谢物的形式排泄，仅有25％为原形。
动物体内研究发现伊马替尼存在约3.4%肝肠循环。
2.3 参比制剂
2.3.1 参比制剂处方
PMDA：二氧化硅，交联聚维酮，硬脂酸镁，微晶纤维素，羟丙甲纤维素，三氧化二铁，聚乙二醇，滑石粉。
FDA：胶态二氧化硅，交联聚维酮，羟丙甲纤维素，硬脂酸镁，微晶纤维素。
片剂包衣材料：红氧化铁，黄氧化铁，羟丙甲纤维素，聚乙二醇，滑石粉。
2.3.2 制剂外观
100 mg片剂（瓶装）：深黄色至棕黄色双凸的薄膜衣片，圆形，除去包衣后显白色至淡黄色。一侧刻有“NVR”，另一侧有刻痕，且刻有“SA”。
PMDA公布：
专利公布：
400 mg片剂（瓶装）：深黄色至棕黄色双凸的薄膜衣片，椭圆形，除去包衣后显白色至淡黄色。一侧刻有“400”，另一侧有刻痕，且刻痕两边均刻有“SL”。
2.4 分析方法
1）溶出方法
FDA：溶出介质：1000 ml 0.1 N HCl，溶出方法：浆法，50 rpm推荐采样时间：5,10,15,20和30 min。
PMDA：溶出介质：1000 ml 0.1 N HCl，溶出方法：浆法，50 rpm。
2）制剂含量测定方法
采用高效液相色谱法测定甲磺酸伊马替尼片的含量。
色谱柱：C18(250 x 4.6 mm, 5μm)；
流动相：1%醋酸铵∶乙腈=77∶23(v/v)；
流速：0.7 mL·min-1；
检测波长：254 nm；
进样量：20 μL。
3）有关物质含量测定
采用高效液相色谱法测定甲磺酸伊马替尼片的有关物质。
色谱柱：C18(250 x 4.6 mm, 5μm)；
柱温：35℃；
流动相：流动相A：称取2.3 g辛烷磺酸钠溶于700 ml水中，并加入300 ml乙腈及1.2 ml稀磷酸；流动相B：称取2.3 g辛烷磺酸钠溶于100 ml水中，并加入900 ml乙腈及1.2 ml稀磷酸；
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时间（min） |
流动相A（V/V） |
流动相B（V/V） |
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0-16 |
98 |
2 |
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16-30 |
98→50 |
2→50 |
流速：2.3 ml/min；
检测波长：267 nm；
进样量：10 μl
2.5 技术难度
1）粒径：药物为BCS2类，粒径会影响药物体内溶出与吸收，需要对参比制剂粒径进行反向解析，并在体外溶出筛选具有区分力的介质。
2）溶出曲线拟合：药物溶解度存在pH依赖性，晶形/晶型都会影响药物的溶出速度，需优化处方控制溶出曲线。
3）制剂工艺：原料药在处方占比大，可能存在流动性问题，湿法制粒的内外加辅料量需要进行对比研究，已获得与参比较相似的溶出状态。
附：日本仿制药溶出曲线图
2.6 开发方案
1） 参比制剂解析
根据参比制剂临床适应症、患者人群、原料药性质以及产品特性，制定目标产品的质量概况（QTPP）；实际研发中，可基于RLD的临床药动学参数、体外溶出和理化性质来确定QTPP。
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目标产品质量概况 |
目标 |
合理性说明 |
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剂型 |
片剂 |
与原研BE |
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剂型设计 |
速释 |
溶出曲线要求：与原研一致 |
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给药途径 |
口服 |
药学等效：与原研一致 |
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规格 |
100/400mg |
药学等效：与原研一致 |
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包装 |
PTP |
稳定性与运输保证完整性要求 |
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药品质量属性 |
物理属性–外观、大小等 |
药学等效要求：必须符合药典或其他相应的质量标准 |
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鉴别 |
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含量 |
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含量均匀度 |
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降解产物 |
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残余溶剂 |
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溶出度 |
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水分 |
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微生物 |
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稳定性，有效期 |
36 月 |
药学等效：与原研一致 |
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针对该项目，参比制剂研究如下表：
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参比制剂研究内容 |
备注 |
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物理特性 |
水分 |
视填充重量而定，如填充量小（小于100mg），需增加至1g进行研究。 |
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片重、厚度、重量、包衣增重 |
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处方分析 |
不溶性辅料 水溶性辅料重量 |
重量法 |
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二氧化硅含量 |
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辅料性质–形态与大小 |
显微镜观测，推测原料粒径、辅料型号及可能的工艺。 |
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API粒径与形态 |
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晶型 |
XRD |
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溶出度研究 |
RLD在质量标准中溶出度曲线 pH 1.0 |
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RLD在不同介质溶出度曲线(盐酸、pH 3/4.0、pH6.8、水) |
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其他可能需要评估的介质 |
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质量对比 |
影响因素、加速预实验 |
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2）处方前研究
–API饱和溶解度：0.1M盐酸、0.01M盐酸、pH4.0、pH6.8缓冲液，为溶出介质选择提供依据。
—药物在各种溶出介质稳定性与滤膜吸附性：为溶出实验取样与检测提供依据。
—原辅料相容性：为辅料筛选提供依据。
—原料药晶型、晶癖对溶出速度的影响。
3）处方工艺研究
—原料粒径对溶出的影响。
—填充剂、崩解剂等用量筛选：评价指标–溶出曲线拟合f2。
—工艺研究：主要对湿法制粒速度时/间、辅料加入顺序/比例、总混时间、压片硬度、包衣增重等对溶出曲线的影响，确认关键工艺参数。
4）稳定性研究
—小试处方确认批与参比制剂初步影响因素与加速试验：初步确认包材和处方工艺稳定性。
—生产预放大批次影响因素试验：确认生产放大工艺可行性。
—连续3批生产批与参比制剂的稳定性对比研究：加速6月与长期36月稳定性对比，制定产品有效期。
实验设计：双交叉，进食
给药剂量：400 mg
实验对象：已稳定服用甲磺酸伊马替尼，剂量为400 mg的患者。
补充说明：进行患者招募工作时应针对给药剂量为400 mg的患者，如患有胃肠道间质瘤（GIST）的患者和处于慢性粒细胞白血病（CML）前三个月治疗期的患者；对所招募患者进行肝毒性筛选，并在临床实验过程中对肝毒性进行监测；服用CYP3A4抑制剂及诱导剂药物的患者不应参与此临床实验。
进食应为清淡的早餐，应在研究方案中明确标注，包括卡路里及食物成分。
体内实验豁免要求：当满足1）400 mg剂量具有可接受的生物等效性研究；2）100 mg剂量组与400 mg剂量组处方比例相似及；3）100 mg剂量组与400 mg剂量组均有可接受的体外溶出实验时，100 mg剂量可豁免体内实验。
综上所述，甲磺酸伊马替尼制剂为速释制剂，BCS分类为2类，药物溶解度存在pH依赖性，粒径和处方工艺均会影响体内释放和吸收，且AUC变异系数超过30%。因此，在仿制药的开发中，原料药晶型/粒径稳定性，以及临床试验控制是成功的重要保障。
本文作者：徐鹏飞，现任职于博志研新。博志研新专注于药物全流程研发服务。
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